Foi treinada pelo Terceiro Hokage, Hiruzen Sarutobi, junto com Jiraiya e Orochimaru, tornando-se uma ninja (mulher-ninja). Prestou muito serviços a Vila Oculta da Folha junto à sua equipe, se, por conseqüência, é uma das mais experientes da história da Vila. Quando criança, junto de Orochimaru, era destaque da equipe por sua inteligência, formando-se Genin aos 6 anos. Com o passar dos anos, Tsunade e sua equipe enfrentam uma das maiores Guerras de todos os tempos: A Terceira Grande Guerra Mundial Ninja, a qual Tsunade contribuiu consideravelmente, unindo medicina à combate como ninguém. Uma das melhores Ninjas Médicas da Areia, Akasuna Chiyo, afirma que a cada veneno que ela criava, Tsunade criava um antídoto em resposta. Foi nesta Guerra também que Tsunade, Jiraiya e Orochimaru tiveram suas habilidades reconhecidas por um dos maiores ninjas da História: Sanshiyou no Hanzou, que os nomeou os “Densetsu no Sannin” ou “Três Ninjas Lendários”
